植物转基因工程的基本过程是怎样的?
您这题目太大了.
几种常用的植物转基因方法
BIOX.CN 2005-5-19 16:54:41 来源:生命经纬
遗传转化的方法按其是否需要通过组织培养再生植株可分成两大类,*一类据要通过组织培养再生植株,常用的方法有农杆菌介导转化法、基因枪法;另一类不需要通过组织培养,目前比较成熟的主要有花粉管通道法.
1农杆菌介导转化法
农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌,它能在自然条件下趋化性地感染大多数双于叶植物的受伤部位,并诱导产生冠痪瘤或发状根.根想农杆菌和发根农杆菌细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒,其上有一段T—DNA,农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将T—DNA插入到植物基因组中.因此,农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系.人们将目的基因插入到经过改造的T—DNA区,借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合,然后通过细胞和组织培养技术,再生出转基因植株.农杆菌介导法起初只被用于双于叶植物中,近年来,农杆菌介导转化在一些单子叶植物(尤其是水稻)中也得到了广泛应用.
2基因枪介导转化法
利用火药爆炸或高压气体加速(这一加速设备被称为基因枪),将包裹了带目的基因的
DNA溶液的高速微弹直接送入完整的植物组织和细胞中,然后通过细脑和组织培养技术,再生出植株,选出其中转基因阳性植株即为转基因植株.与农杆菌转化相比,基因枪法转化的一个主要优点是不受受体植物范围的限制.而且其载体质粒的构建也相对简单,因此也是目前转基因研究中应用较为广泛的一种方法.
3花粉管通道法
在授粉后向于房注射含目的基因的DNA溶液,利用植物在开花、受精过程中形成的花粉管通道,将外源DNA导入受精卵细胞,并进一步地被整合到受体细胞的基因组中,随着受精卵的发育而成为带转基因的新个体.该方法于印年代初期由我国学者周光字提出,我国目前推广面积很大的转基因抗虫棉就是用花粉管通道法培育出来的.该法的很大优点是不依赖组织培养人工再生植株,技术简单,不需要装备精良的实验室,常规育种工作者易于掌握.
植物遗传转化的常用方法有哪些
植物遗传转化的常用方法有哪些
应用重组DNA技术、细胞组织培养 技术或种质系统转化技术,有目的地将外源基因或DNA片段插入到受体植物基因组中并通过减数分裂获得新植株的技术。
什么是植物遗传转化系统?
植物遗传转化系统是指利用生物的、物理的或化学的途径将外源基因导入植物细胞,而建立转基因植株的技术体系。迄今已经开发了多种遗传转化系统,包括载体型遗传转化系统、DNA直接转化系统、种质转化系统等。成功的植物遗传转化必然要依赖于有效而适用的转化系统。
遗传转化、植物遗传转化体系和植物遗传转化体系建立的定义
遗传转化,是指同源或异源的游离DNA分子(质粒和染色体DNA)被自然或人工感受态细胞摄取,并得到表达的水平方向的基因转移过程。根据感受态建立方式,可以分为自然遗传转化和人工转化,前者感受态的出现是细胞一定生长阶段的生理特性;后者则是通过人为诱导的方法,使细胞具有摄取DNA的能力,或人为地将DNA导入细胞内。[1]
遗传转化是指同源或异源的游离DNA分子(质粒和染色体DNA)被自然或人工感受态细胞摄取,并得到表达的水平方向的基因转移过程。根据感受态建立方式,可以分为自然遗传转化和人工转化,前者感受态的出现是细胞一定生长阶段的生理特性;后者则是通过人为诱导的方法,使细胞具有摄取DNA的能力,或人为地将DNA导入细胞内。
植物遗传转化是应用重组DNA技术、细胞组织培养 技术或种质系统转化技术,有目的地将外源基因或DNA片段插入到受体植物基因组中并通过减数分裂获得新植株的技术。
植物遗传转化方法包括:农杆菌介导法、基因枪法(微弹轰击法)、花粉管通道法
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常用的植物转基因方法:到目前为止,已确立了11种植物转基因方法。根据其转化原理,可分为三大类,即利用载体的转化系统,不用任何载体,采用物理、化学方法直接将外源基因导入受体细胞的直接转化系统以及利用植物生殖细胞等种质媒介的种质转化系统。现将这三大类系统的载体、转化原理、转化方法和受体细胞等归纳如图
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植物遗传转化方法包括:农杆菌介导法
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植物遗传转化方法包括:基因枪法(微弹轰击法)
基因枪法的优点:1.无宿主限制;2.靶受体类型广泛;3.可控度高;操作简便。
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植物遗传转化方法包括:花粉管通道法
在授粉后向子房注射合目的基因的DNA溶液,利用植物在开花、受精过程中形成的花粉管通道,将外源DNA导入受精卵细胞,并进一步地被整合到受体细胞的基因组中
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花粉管通道法的很大优点是不依赖组织培养人工再生植株,技术简单,不需要装备精良的实验室,常规育种工作者易于掌握。
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